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磁珠法核酸提取技术

来源:上海领骏作者:上海领骏网址:http://www.lnjnbio.com
文章附图

磁珠法核酸提取技术

说到磁珠法,那我们首先当然必须得了解磁珠,什么是磁珠呢?磁珠是利用一定的组织包被四氧化三铁而形成的可以被磁铁吸附的同时有能通过表面包被物吸附(结合)核酸的神奇的小珠子。之所以说他神奇,是因为他的用途很大!它可以实现核酸提取的自动化和高通量化。

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磁珠结构:

磁珠一般分为三层结构:

1.最内层:为支持结构,如聚苯乙烯做的内核;

2.中间层:磁层,作用是与磁力架上的磁铁相互吸附,从而分离核酸与反应溶液,材料通常为Fe3O4

3.最外层:修饰层,一般为带负电的基团;

磁珠法核酸提取原理

在磁珠法的反应体系中,核酸分子(DNA & RNA)会由线性压缩成球状,暴露出核酸骨架上大量的负电基团与反应体系中的阳离子连接,在磁珠最外层负电基团的作用下,形成阴离子-阳离子-阴离子的盐桥结构,使核酸分子被特异性地吸附到磁珠表面。而当反应缓冲液被弃除后,加入水性分子,会快速充分水化核酸分子,解除三者之间的离子相互作用,使吸附到磁珠上的核酸分子被纯化出来。

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磁珠法核酸提取的优势

磁珠法DNA提取是纳米科技与生物技术的完美结合,具有其它DNA提取方法不可比拟的优势:

1)样本需求量低:微量的材料即可提到高浓度的核酸;

2)操作简单快速:整个操作流程基本分为五步(裂解、结合、洗涤、干燥、洗脱),全程无需离心操作,大多可在30~60分钟内完成;

3)质量稳定可靠:游离的磁珠与核酸的结合量更大,特异性的结合使得核酸纯度更高,且可通过控制磁珠表面基团来调节核酸回收量;

4)全自动化操作:采用核酸提取仪可实现自动化、高通量操作,可实现几十甚至几百个样品的提取;

5)安全无毒无害:试剂不含酚、氯仿等有毒化学试剂,完全符合现代化环保理念。

磁珠法——其他应用领域

当然,除了用作核酸提取,根据不同的表面处理与标记,还可将磁珠应用到其他的领域

.细胞分离(CD4CD8

可进一步用于肿瘤检测与诊断等

.蛋白、抗体分离(氨基磁珠、羧基磁珠、环氧基磁珠)

可进一步用于疾病的检测与诊断等